Validación del método elisa para la determinación cuantitativa de antígeno prostático específico como prueba diagnóstica en el laboratorio Quintanilla S.R.L. de la ciudad de Trujillo
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Date
2006
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Publisher
Universidad Nacional de Trujillo
Abstract
En el presente trabajo se investigó si el método ELISA para la determinación de antígeno prostático específico (APE) empleado en el Laboratorio Quintanilla S.R.L. cumple con los criterios de validación. Para esto se evaluaron los siguientes parámetros: linealidad, precisión (repetibilidad y reproduciblilidad), exactitud, límite de detección, límite de cuantificación y robustez, los cuales fueron determinados de acuerdo a lo establecido por la Asociación Española de Farmacéuticos de la Industria y siguiendo los procedimientos descritos en el inserto del kit de reactivos provisto por el fabricante “DIAGNOSTIC AUTOMATION INC.” Los resultados del estudio nos muestran que la curva de calibración fue lineal con un coeficiente de correlación igual a 0.998; la prueba estadística de la pendiente confirmó la linealidad. El coeficiente de variación en el estudio de la repetibilidad fue igual a 4,604 % y en el caso de la reproducibilidad fue de 4,432%. La exactitud del método quedó demostrada luego de aplicar el test t-student con el 95% de confianza y 8 grados de libertad y obtener un t experimental (1.541) menor al t de tablas (2.306). Los límites de detección y cuantificación fueron 0.272 ng/mL y 0.908 ng/mL respectivamente. El método resultó ser robusto ante la variación de analistas y puntas para micropipetas más no para el caso de variación de temperatura. De esta manera, se demostró que el método cumple con los criterios de validación.
Description
In the present assay it was investigated if method ELISA for the determination of prostate specific antigen (PSA) employee in the Quintanilla Laboratory S.R.L. fulfills the validation criteria. For this the following parameters were evaluated: linearity, precision (repeatability and reproducibility), exactitude, detection and quantification limits and robustness, which were determined according to the established by the Spaniard Association of Pharmacists of the Industry and following the procedures described in the inserted of kit of reagents provided by the manufacturer "DIAGNOSTIC AUTOMATION INC". The results of the study show us that the calibration chart was linear with a correlation coefficient equal to 0.998; the statistical test of the slope confirmed the linearity. The variation coefficient in repeatability assay was 4.604% and in the case of the reproducibility assay it was 4,432%. The exactitude of the method was demonstrated after applying the t-student test with 95% of confidence and 8 degrees of freedom and obtaining a t - experimental value (1.541) smaller to t – distribution table value (2.306). The detection and quantification limits were 0,272ng/mL and 0,908ng/mL respectively. The method turned out to be robustness to the variation of analysts and ends for micropipettes more do not to the case of temperature variation. This way, is demonstrated that the method fulfills the validation criteria
Keywords
Ape, Reproducibilidad, Exactitud, Elisa, Validación, Linealidad, Robustez, Repetibilidad, Precisión