Identificación y cuantificación de las saponinas contenidas en el fruto de la especie cucumis dipsaceus por cromatografía de líquidos de alta resolución (HPLC)
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Date
2007
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Publisher
Universidad Nacional de Trujillo
Abstract
El presente trabajo consistió en identificar el tipo de saponina por reacciones cualitativas y a la vez cuantificar la saponina de la especie Cucumis dipsaceus “jaboncillo de campo” por cromatografía líquida de alta resolución (HPLC); para lo cual se diseñó un método de trabajo de tal manera que fue posible alcanzar los objetivos. En primer lugar, se extrajeron las saponinas por maceración en hexano y luego en agua. Posteriormente se sometió a una extracción sucesiva usando solventes de polaridad creciente; cloroformo, acetato de etilo y n-butanol, obteniéndose un producto pulverulento y blanquecino. La hidrólisis fue realizada con ácido clorhídrico concentrado. La mezcla se reflujó en baño María entre 68 – 70 ºC por 20 minutos. Las sapogeninas liberadas fueron extraídas con cloroformo. Se preparó soluciones de saponinas patrones experimentales mediante las cuales se obtuvo la curva de calibración; que sirvió para cuantificar por HPLC las saponinas del Cucumis dipsaceus. El análisis cromatográfico se realizó con un Cromatógrafo HPLC HP1050 equipado con una columna Lichrospher 100 RP – 8, 5 μm, 125 x 4 mm HP, con detección a 264 nm, a 2 mL/min y fase móvil metanol grado HPLC. El análisis químico permite concluir que en el producto extraído y purificado de Cucumis dipsaceus existen saponinas triterpénicas pentacíclicas a la concentración del 67%. Los azúcares del hidrolizado no son glucosa ni fructosa
Description
The present work consisted of to identify the type of saponins using qualitative reactions and at the same time to quantify the saponins from Cucumis dipsaceus species, “soap land” by Chromatography of Liquids of High Resolution (HPLC). In this way, we decided to adopt a new approach in order to achieve the objectives. First, the saponins were extracted by maceration, the first time in hexan and the second time in water. Then it suffered consecutive extractions using increasing solvent polarity; chloroform, ethyl acetate and n-butanol, as a result we obtained a pulverulent and off-white product. The hydrolyzes was done with hydrochlorate acid. The mixture was refluxed in a Maria bath between 68-70ºC for 20 minutes. The sapogenins released were extracted with chloroform. It was prepared solutions of experimental patron saponins by means of which the calibration curve was obtained; that it was good to quantify for HPLC the saponins of the Cucumis dipsaceus. The analysis cromatographic was carried out with a cromatographo HPLC HP1050 equipped with a column Lichrospher 100 RP - 8, 5 μm, 125 x 4 mm HP, with detection to 264 nm, to 2 mL/min and mobile phase methanol grade HPLC. The chemical analysis allows to conclude that in the extracted product and purified of Cucumis dipsaceus saponins triterpenids pentacycle exists to the concentration of 67%. The sugars of the hydrolized are not glucose and fructose neither.
Keywords
Saponinas, Cucumis dipsaceus, Sapogeninas, Hplc