Validación de una metodología para determinar rebaudiósido a por cromatografía líquida de alta resolución hplc de la planta de stevia rebaudiana bertoni.
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Date
2012
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Publisher
Universidad Nacional de Trujillo
Abstract
En este trabajo se presenta la validación de un método analítico para la cuantificación de Rebaudiósido A. Los parámetros estadísticos empleados fueron: La linealidad; obteniéndose un coeficiente de correlación r= 0,9999 para Rebaudiósido A, siendo el valor mínimo permisible de 0.999. En cuanto a los límites de detección y cuantificación, se obtuvo límites de detección de 3.56ppm para Rebaudiósido A; mientras que límites de cuantificación de 11.01 ppm. Para la repetibilidad del sistema, con un número de seis determinaciones y en concentraciones de 250 ppm, se obtuvo un coeficiente de variación de 0.94% para Rebaudiósido A, siendo menor al valor máximo aceptable de 2%. Para la Repetibilidad del método, con un número de tres determinaciones y en concentraciones de 200, 250 y 300ppm, se obtuvo un coeficiente de variación para Rebaudiósido A de 0.40% ,0.87% y 1.20% para concentraciones de 200, 250 y 300 ppm respectivamente; por otra parte para la precisión intermedia del método se encontró resultados similares en tres analistas diferentes y en diferentes días, obteniéndose los siguientes resultados: un coeficiente de variación para el Rebaudiósido A para 200, 250 y 300 ppm de 0.51%, 1.31% y 1.52% respectivamente, siendo todos estos menores al valor máximo aceptable de 2%. El valor del porcentaje de recuperación media fue de 99.01% para Rebaudiósido A, lo cual está dentro de los límites de las especificaciones (98% - 102%) del valor teórico para exactitud. En el método analítico el parámetro de selectividad se expresó en términos del factor de resolución en relación con el pico de elución más próxima siendo estos mayores a 1.5.
Description
This work presents the validation of an analytical method for quantification of Rebaudioside A. The statistical parameters that used were: The linearity and it was obtained a correlation of r= 0,9999 for Rebaudioside A being the minimum permissible value of 0.999.Regarding the detection and quantification limits, it was obtained detection limits of 3.56 ppm for Rebaudioside A, while quantification limits of 11.01. For repeatability of the system with a number of six determinations and using concentrations of 250 ppm was obtained a coefficient of variation of 0.94% for Rebaudioside A being less than the maximum acceptable value of 2%.For repeatability of the method, with a number of three determinations and at concentrations of 200, 250 and 300ppm, was obtained a coefficient of variation for Rebaudioside A of 0.40%, 0.87% and 1.20% for concentrations of 200, 250 and 300 ppm respectively. These values were lower than the maximum acceptable value of 2%. In addition, in the case of the intermediate precision of the method was found similar results in three different analysis on different days. The value of the average recovery rate was of 99.01% Rebaudioside A, which are within specification limits (98% - 102%) of the theoretical value.In the analytical method Selectivity was expressed in terms of resolution factor in relation to the closest peak of elution these being greater than 1.5 and thus demostrating the selectivity of the method.
Keywords
Esteviósido, Rebaudiósido a, Validación, Hplc.