Efecto del sobrenadante de los cultivos de Lactobacillus spp. aislados de queso artesanal sobre la inhibición del crecimiento de Staphylococcus aureus y Escherichia coli.
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Date
2019
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Publisher
Universidad Nacional de Trujillo
Abstract
La investigación, tuvo como objetivo evaluar el efecto del sobrenadante de los cultivos de Lactobacillus spp. aislados de queso artesanal sobre la inhibición del crecimiento de Staphylococcus aureus ATCC 6538 y Escherichia coli ATCC 8739; para lo cual se obtuvo 30 quesos artesanales (Blanco, mantecoso y arenoso) de la ciudad de Otuzco, aislándose 128 cultivos de Bacterias Ácido Lácticas (BAL) de las cuales ocho fueron identificadas como Lactobacillus sp. por presentar las características culturales: Gram positiva, catalasa negativa, asporógenas, producción de gas a partir de glucosa, crecimiento a diferente pH y diferentes concentraciones de NaCl en caldo MRS. A los cultivos identificados como Lactobacillus se los sembró por superficie en agar MRS, luego se los resembró en caldo MRS para posteriormente centrifugarlos a 4 °C a 3500 rpm por 25 minutos y filtrar los sobrenadantes al vacío usando membranas millipore de 0.22 μm de diámetro para la obtención del Sobrenadante Libre de Células (SLC). Para determinar el efecto de los SLC de Lactobacillus sp. sobre la inhibición de crecimiento de E. coli ATCC 8739 y S. aureus ATCC 6538 se evaluó mediante el método de difusión en agar por pocillos, considerándose una inhibición significativa a los halos mayores o iguales a 6 mm de diámetro. La identificación de Lactobacillus sp se realizó mediante el sistema API 50CH, donde las especies identificadas fueron: L. brevis, L. buchneri, L. plantarum, L. paracasei ssp paracasei y L. pentosus; de las cuales L. brevis y L. plantarum presentan mayor actividad inhibitoria contra S. aureus y E. coli. Concluyéndose que, las especies de Lactobacillus aisladas e identificadas presentan inhibición significativa frente S. aureus así como también frente E. coli; siendo L. brevis la especie que tuvo mayor inhibición contra S. aureus (9.4 mm) y E. coli (6.6 mm) mientras que L. pentosus, L. plantarum y L. paracasei tuvieron menor inhibición contra los microorganismos evaluados.
Description
The objective of the research was to evaluate the effect of the supernatant of the Lactobacillus spp cultures isolated from artisan cheese on the inhibition of growth of Staphylococcus aureus and Escherichia coli; for which it was obtained 30 artisanal cheeses (White, buttery and Andy) of the city of Otuzco, isolated 128 cultures of lactic acid bacteria (BAL) of which eight werw identifid as Lactobacillus sp. to present the cultural characteristics: Gram positive, catalase negative, asporogene, production of gas from glucose, growth at different pH and differetn concentrations of NaCl in broth MRS. The cultures identified as Lactobacillus were seeded surface on MRS agar, then reseeded in MRS broth and then centrifuged at 4 ° C at 3500 rpm for 25 minutes and the supernatants were filtered vacuum using 0.22 μm diameter millipore membranes for obtaining the cell-free supernatant (SLC). To determine the effect of the SLC of Lactobacillus sp. on the inhibition of growth of E. coli ATCC 8739 and S. aureus ATCC 6538 was evaluated by agar well diffusion method, considering a significant inhibition to diameters of inhibition growth zones greater than or equal to 6 mm in diameter. The identification of Lactobacillus sp. was realized by the API 50CH system, where the species indentified were: L. brevis, L. buchneri, L. plantarum, L. paracasei ssp paracasei and L. pentosus; of which L. brevis and L. plantarum had more antimicrobial activity against S. aureus and E. coli. Concluding that, the Lactobacillus’s species isolated and identified show significant inhibition against S. aureus as well as against E. coli; being L. brevis the specie had major inhibition against S. aureus (9.4 mm) and E. coli (6.6 mm) while that L. pentosus, L. plantarum and L. paracasei had minus inhibition against the evaluated microorganisms.
Keywords
Bacterias acido lácticas, Actividad antimicrobiana, Sthapylococcus aureus