Producción de polihidroxibutirato por Azotobacter chroococcum en un medio de cultivo a base de vinaza a concentraciones de 25% y 50%
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Date
2018
Authors
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Publisher
Universidad Nacional de Trujillo
Abstract
La presente investigación fue realizada con el objetivo de evaluar la producción de polihidroxibutiratos (PHB) por Azotobacter chroococcum utilizando un medio de cultivo a base de vinaza a concentraciones de 25% y 50%. Para ello, primero se reactivó A. chroococcum sembrando en caldo Ashby modificado y luego en Agar Ashby modificado, las colonias reactivadas fueron subcultivadas y caracterizadas morfológica y bioquímicamente. Además, se le realizó la tinción Negro Sudan B para detectar la producción de PHB. El pre-tratamiento de la vinaza se realizó por el método de carbón activado. Luego a 10 mL de cultivo de la bacteria en caldo Ashby se centrifugó para obtener un inóculo concentrado y luego se resuspendió en 10 mL de solución salina (0.85%), éste se transfirió a 200 mL de solución pre-tratada al 25% y otro al 50% completándolo con el caldo Ashby. El pH del medio se ajustó a pH 7,0 y se esterilizó por filtración. La producción por la bacteria se llevó a cabo en matraces Erlenmeyer de 250 mL mediante agitación durante 72 horas a 30°C. Para la medición de PHB se realizó por el método de Hahn, el cual consistió en concentrar la biomasa en suspensión 4% (p/v), después se mezcló con el 30% de hipoclorito de sodio (v/v) por 150 min a 30ºC. Luego el PHB fue separado de la fracción acuosa por centrifugación a 6000 rpm por 15 min. Se enjuagó con agua y se centrifugó de nuevo. El pellet obtenido se pesó, encontrándose que la concentración de vinaza de 50% presenta una mayor producción de PHB, con 1.97 g/L en peso seco. Según el análisis estadístico aplicado existe diferencia significativa entre las diferentes concentraciones de vinaza, 25% y 50%, para la producción de PHB por A. chroococcum.
Description
Keywords
Azotobacter chroococcum, polihidroxibutiratos