Cuantificación del daño de adn por el test del cometa en linfocitos humanos expuestos al extracto etanólico de leucaena trichodes
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Date
2012
Authors
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Publisher
Universidad Nacional de Trujillo
Abstract
En el presente trabajo, se analizó el daño del ADN mediante el test del cometa en linfocitos humanos expuestos al extracto etanólico de hojas de Leucaena trichodes “chapra”. Se obtuvieron linfocitos de 5 donadores masculinos, sanos, no fumadores con un parámetro de edad entre 20 y 30 años y se cultivaron en medio RPMI incubándose a 37ºC por 24 horas. Los linfocitos se expusieron a soluciones de extracto etanólico de L. trichodes “chapra” a concentraciones de 0; 0,4%; 1,6% y 3,2% durante 30 minutos, se consideró como control positivo a Peróxido de Hidrógeno 100uM y control negativo Buffer Fosfato (PBS). Las muestras fueron embebidas en gel de Agarosa de Bajo Punto de Fusión y se colocaron en láminas portaobjetos previamente preparadas con una primera capa de agarosa Normal 1%, las láminas fueron expuestas en un buffer de lisis toda la noche y finalmente fueron sometidas a una electroforesis alcalina. Las células fueron coloreadas con Naranja de Acridina y se observaron en un microscopio de fluorescencia con el objetivo 10X y el filtro 1. Los valores promedios del “%DNA in Tail” y “Tail Moment”, mostraron un incremento en función del aumento de la concentración del extracto etanólico de L. trichodes. Valores que indican roturas en el DNA de linfocitos humanos por efecto del extracto etanólico de L. trichodes.
Description
Keywords
Extracto etanólico, Test del cometa, Linfocitos humanos, Daño del dna, Leucaena trichodes