Eficacia de la técnica de Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay (ELISA) en la detección de anticuerpos anti Fasciola hepatica utilizando antígenos de excreción-secreción y totales en el diagnóstico de la fasciolosis humana.
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Date
2016
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Universidad Nacional de Trujillo
Abstract
El presente trabajo tuvo como objetivo determinar la eficacia de la técnica de Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay (ELISA) en la detección de anticuerpos anti Fasciola hepatica de tipo Ig G en sueros de pacientes con fasciolosis, con otras parasitosis y no parasitados utilizando antígenos de excreción-secreción (E/S) y totales de las formas adultas del parásito, en el diagnóstico de la fasciolosis humana. Los antígenos de E/S fueron obtenidos a las 18 horas de incubación de los parásitos en Minimum Essential Medium Eagle y los antígenos totales se obtuvieron por homogenización y sonicación. Se determinó la concentración de las proteínas de ambos antígenos mediante el método colorimétrico de Bradford, y luego estos antígenos fueron preparados a la concentración de 3 μg/mL, los cuales fueron enfrentados a una dilución de sueros de 1/500 y a una dilución de conjugado enzimático de 1/2000. Para evaluar la eficacia de la técnica se utilizaron 40 sueros positivos a F. hepatica, 20 sueros de pacientes con otras parasitosis pero negativos a fasciolosis por Western Blot y 23 sueros de personas no parasitadas; los cuales fueron enfrentados a los antígenos de E/S y totales presentes en las placas sensibilizadas. El valor del punto de corte se calculó considerando la media de la densidad óptica a una longitud de onda de 492 nm de los sueros negativos más dos desviaciones estándar. La técnica de ELISA con antígenos de E/S de F. hepatica presentó una sensibilidad de 98% y especificidad de 79% y utilizando los antígenos totales de F. hepatica, una sensibilidad de 93% y especificidad de 81%.
Description
Keywords
Fasciola hepatica, Antígenos totales, Elisa, Antígenos de excreción-secreción