Browsing by Author "SERRANO SEGURA, Kevin Osnar"
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Item Estandarización y validación de la técnica de Reacción en Cadena de la Polimerasa Nested Múltiple para el diagnóstico de HTLV-1(Universidad Nacional de Trujillo, 2019) SERRANO SEGURA, Kevin Osnar; LUJAN VELASQUEZ, ManuelaEn el Perú se desconoce la existencia de un algoritmo normativo de diagnóstico, se asume que es similar al del VIH por ello se estandarizó y validó una prueba de PCR nested múltiple para el diagnóstico de HTLV-1 en muestras de ADN proviral de material de referencia de la línea celular MT-2. Se validó la prueba con muestras de ADN proviral a partir de sangre total, se determinó en 70 muestras caracterizadas por serología, su sensibilidad y especificidad analítica, veracidad y precisión en comparación con la prueba de inmunoblot (gold estándar). Los resultados de la validación mostraron un límite de detección de 0.5 ng de ADN por reacción de 25 μL del gen Pol y LTR y una precisión con una tasa de detección 100% para 0.4, 0.5 y 0.6 ng de ADN. Además, en comparación con una prueba de Inmunoblot (INNOLIA) considerada prueba de referencia para nuestro estudio, la PCR nested múltiple obtuvo un 97% de sensibilidad, 100% de especificidad, un valor predictivo positivo y negativo de 97.5 y 99.9% respectivamente y un factor de concordancia kappa de 0.97. El método estandarizado (PCR nested múltiple) en este estudio es idóneo y valido para el diagnóstico de HTLV-1 en muestras de sangre total y puede ser implementado en el algoritmo del diagnóstico de HTLV en el Laboratorio de Referencia Nacional de VTS-VIH/SIDA y resolver los resultados indeterminados para el diagnóstico confirmatorio de los niños menores de 18 meses con una alta sensibilidad y especificidad.