Selección de Bacillus spp. nativos productores de quitinasas aislados de suelos de cultivo de Laredo, Trujillo - Perú, 2017
No Thumbnail Available
Date
2018
Authors
Journal Title
Journal ISSN
Volume Title
Publisher
Universidad Nacional de Trujillo
Abstract
En la presente investigación se evaluó la actividad quitinolítica de Bacillus spp. nativos productores de quitinasas a partir de suelos de cultivo de Laredo, Trujillo-Perú con el objetivo de aislar y seleccionar cultivos puros de Bacillus spp. nativos con mayor capacidad quitinolítica. Mediante la siembra en Agar almidón al 0.1%, se logró aislar 21 cultivos puros de Bacillus spp. nativos. Para la determinación cualitativa de la actividad quitinolítica se preparó agar mínimo de sales que comprende 0.7 g de K2HPO4, 0.5g de MgSO4. 7H2O, 0.3 g de KH2PO4, 0.01g de FeSO4.7H2O, 1.26 g de MnSO4, 0.001g de ZnSO4.7H2O, 20g de agar agar y nanoquitina 0.5% a pH 8.0. Los cultivos fueron reactivados mediante siembra por estría en frascos de 5mL de capacidad con AN a 37ºC por 18-24h. A partir de cultivo joven, se sembró por puntura sobre AMS con nanoquitina al 0.5%, pH 8 a 30ºC por 8 días, la prueba se trabajó por duplicado. 11 de los 21 aislamientos mostraron halo de hidrólisis ≥1 mm después de 8 días a 30ºC, siendo consideradas como productores de quitinasas. Mediante la evaluación cualitativa, se logró seleccionar 3 aislamientos como mejores productores. Los aislamientos seleccionados fueron reactivados en frascos con AN a 37ºC por 18h. A partir de cultivo joven, se prepararon suspensiones con ADE, la turbidez fue equivalente al tubo Nº5 del Nefelómetro de Mac Farland( 15x108UFC/mL).Para la evaluación semicuantitativa de los 3 aislamientos seleccionados, en AMS con nanoquitina al 0.8% se sembraron 20uL de inóculo estandarizado a 2 x 1011 cél /mL, a 30ºC por 21 días. Con la prueba estadística ANOVA se demostró que si hubo diferencia significativa (p <0.05), lo que permite concluir que los 3 aislamientos evaluados no producen la misma cantidad de quitinasas.
Description
Keywords
hidrólisis, quitina, quitinolítico