Efecto de la radiación ultravioleta sobre el crecimiento de Bacillus sp. productor de celulasas
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Date
2014
Authors
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Publisher
Universidad Nacional de Trujillo
Abstract
Se determinó el efecto de la radiación ultravioleta sobre el crecimiento de Bacillus sp productor de celulasas, aislado de bagazo de caña de azúcar. Para lo cual se realizó una siembra de la bacteria en agar carboximetilcelulosa 1% (CMC), y se preparó una suspensión en Solución Salina Fisiológica estéril equivalente (SSFE) al tubo Nº1 del nefelómetro de Mac Farland y se inoculó 1mL en 99 mL de caldo CMC al 1% suplementado una fuente de nitrógeno y sales minerales contenidos en un biorreactor esterilizado, y se puso en funcionamiento en agitación constante de 200 rpm a 37°C por 6 h. Luego se centrifugó el contenido a 4 000 rpm por 15 min, seguidamente ser realizó dos lavados de la población bacteriana con SSFE, y se preparó una suspensión en buffer fosfato pH 6.0, equivalente a la concentración del tubo N° 1 del nefelómetro de Mac Farland. Finalmente, se colocó 1.5 mL de esta suspensión en placas Petri y se irradió con luz ultravioleta a 44 cm de distancia por 10, 20, 30, 40, 50, y 60 segundos, respectivamente. A cada suspensión bacteriana irradiada, se realizó diluciones y se sembró 1 mL de dilución por el método de incorporación en agar CMC, se incubó a 37 ºC por 24 h. Pasado este tiempo, se hizo recuentos de las colonias con ayuda de una cámara cuenta colonias y se expresó en UFC/mL. Los resultados obtenidos en relación al tiempo de exposición fueron graficado haciendo uso del software EXCEL, determinándose que la radiación ultravioleta tiene un efecto bactericida, por la disminución de la población bacteriana en función del tiempo de irradiación, deduciéndose que para lograr obtener el 0,1 % de sobrevivientes, posiblemente mutados, fue de 40 segundos.
Description
Keywords
Bacillus sp, Bagazo de caña de azúcar, Agar carboximetilcelulosa