Comparación de antígenos de excreción/secreción y del líquido seudocelómico de Toxocara canis mediante Western Blot utilizando IgG producidos en Oryctolagus cuniculus.
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Date
2014
Authors
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Universidad Nacional de Trujillo
Abstract
Se comparó a los antígenos de excreción-secreción y de líquido seudocelómico de la formas adultas de Toxocara canis mediante la técnica de “Western blot” utilizando anticuerpos específicos producidos en conejo, Oryctolagus cuniculus, raza Neozelandesa inmunizado experimentalmente. Para ello, las formas adultas vivas de T. canis fueron recolectadas del intestino delgado de cachorros de Canis familiaris “perro” infectados naturalmente, lavados con PBS y cultivados en el medio de cultiv mínimo esencial (MiniumEssential Media –MEM Eagle- BioRad) durante 24 horas para obtener los productos de excreción/secreción que contengan a los antígenos y se obtuvo el líquido seudocelómico de la extracción de parásitos enteros. Los anticuerpos específicos, por su parte, fueron obtenidos de los conejos por inoculación vía subcutánea, de 209.0 ug/mL productos excretados/secretados obtenidos a las 24 horas de cultivo, según esquemas previamente establecidos y de 1410 ug/mL del líquido seudocelómico. Mediante la técnica de “Western blot”, se detectaron 11 bandas antigénicas de los productos de excreción/secreción inmunodominantes cuyos pesos moleculares, en Kilodaltons (KDa), fueron: 70.7, 67.6, 39.8 ,35.4 ,30.1 ,28.2 ,21.1 ,19.1 ,17.8 ,12.6 y 11.2 kDa, de los cuales cinco han sido también halladas en las larvas infectivas y del líquido seudocelómico se detectaron 15 bandas antigénicas cuyos pesos moleculares, en Kilodaltons (KDa), fueron: 77.6, 70.7, 67.1, 50.1, 48.9, 39.8, 30.1, 28.2, 26.3, 22.4, 18.2, 17.8, 12.6, 11.8 y 11.2 KDa donde también seis bandas han sido halladas en larvas infectivas por lo que podrían utilizarse las dos formas antigénicas en el diagnóstico de la toxocariasis humana. Se concluye que los antígenos de excreción / secreción de Toxocara canis inducen la producción de anticuerpos en conejos inmunizados experimentalmente teniendo como propósito su uso en el diagnóstico de Toxocariasis canis en seres humanos.
Description
Keywords
Western blot, Antígenos de excreción/secreción, Toxocara canis, Antígenos de líquido seudocelómico canis familiaris