Efecto de la temperatura y pH en la producción de amilasas por Bacillus licheniformis FGM-A15 en un biorreactor agitado.
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Date
2015
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Universidad Nacional de Trujillo
Abstract
El presente trabajo de investigación tuvo como objetivo determinar el efecto de la temperatura y pH en la producción de amilasas por Bacillus licheniformis FGM-A15 en un biorreactor agitado hasta las 72h de incubación. El cultivo bacteriano fue reactivado mediante siembra en placas conteniendo agar almidón 0.1% e incubadas a 37°C por 24h, a partir del cultivo joven se preparó una suspensión con solución salina fisiológica estéril, equivalente al tubo N° 3 del nefelómetro de Mc Farland (9.0 x 108 UFC/mL). En cada biorreactor se colocó 180mL de caldo almidón 0.6% - buffer fosfato al pH de ensayo (6.0, 7.0 y 8.0), suplementado con sales: (NH4)2SO4, CaCl2 y CuSO4, luego se agregó 20mL del inoculo estandarizado (9.0 x 108 UFC/mL), y se puso en funcionamiento e incubo a cada una de las temperaturas de ensayo (25, 40 y 55°C). Se determinó la producción de amilasas presentes a los tiempos 0, 12, 24, 36 y 72h extrayendo 10mL de muestra de cada biorreactor y se centrifugó. Al sobrenadante (extracto enzimático) separado se cuantificó la cantidad de amilasas producidas en relación al tiempo de incubación, midiendo el almidón residual en un espectrofotómetro y se determinó las unidades enzimáticas de amilasas (UA/mL) y fueron analizados mediante las Pruebas de Tukey y Duncan. Se determinó que hay diferencia significativa entre las 24 y 36h de incubación y se encontró mayor producción de amilasas (UA/mL) a 55°C a pH neutro.
Description
Keywords
Bacillus licheniformis fgm-a15, Biorreactor, Unidades enzimáticas