Tesis de Segunda Especialidad

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Identificación molecular y genotipificación de aislados de Staphylococcus aureus mediante REP- PCR y secuenciamiento de DNA genómico
(Universidad Nacional de Trujillo, 2020-01-17) Ganoza Rondón, Carlos Víctor; Colina Venegas, Juan José; Robles Castillo, Heber Max
Se identificó y genotipificó Staphylococcus aureus aislados de muestras clínicas y alimentos mediante técnicas de PCR y secuenciamiento de DNA genómico. Se obtuvo el DNA de 20 aislados de S. aureus las que se caracterizaron en primera instancia por microbiología convencional, utilizando el sistema de identificación y antibiograma MICROSCAN®. La identificación molecular de los aislados se realizó mediante PCR multiplex para 3 genes específicos: coa (coagulasa), nuc (nucleasa), 16S rDNA (16S rDNA); y por secuenciación del gen 16S rDNA. Para la genotipificación de las cepas se utilizaron 2 metodologías: REP-PCR y MLST. Se logró identificar molecularmente los 20 aislados de S. aureus, mediante PCR multiplex y secuenciamiento del gen 16S rDNA. Se encontraron 7 genotipos (A, B, C, D, E, F, G, H) distintos mediante la técnica de REP-PCR y 10 genotipos (STs 5, 6, 25, 97, 101, 106, 2090, 2372, 3125, 5409) mediante la técnica MLST con el genotipo de mayor frecuencia ST97 en muestras de leche. Estos resultados permitieron concluir que, mediante el uso de estas técnicas se identificó y genotipificó a Staphylococcus aureus aislados de muestras clínicas y alimentos.